液相色譜法測(cè)定動(dòng)物組織中抗生素殘留量

液相色譜法測(cè)定動(dòng)物組織中抗生素殘留量

    液相色譜法測(cè)定動(dòng)物組織中抗生素殘留量采用EDTA+磷酸（1+1）-三氯乙酸提取，應(yīng)用C18固定柱富集、凈化，以取得較好的分離效果。然后以保留時(shí)間定性，以峰面積定量。具體檢測(cè)方法如下：

樣品的提取

    四環(huán)素、土霉素的提取。稱取10.0g樣品于100mL比色管中，加入0.01mol/L EDTA二鈉-0.04mol/l磷酸（1:1）混合液30mL，搖勻，再加入50%三氯乙酸2mL，搖勻，用EDTA-磷酸混合液定容至50mL，樣品液全部轉(zhuǎn)移至勻漿瓶中，用組織勻漿機(jī)高速勻漿1min，勻漿液于45℃以下水浴保溫15min，待靜置分層后，離心10min（2500r/min），上層清液過濾，收集濾液25mL備用。用2mL甲醇潤(rùn)濕Sep-Pak C18柱，字啊用10ml蒸餾水置換，然后依次用5%EDTA二鈉水溶液5mL、10mL蒸餾水流過。將濾液通過Sep-Pak C18柱，分4次用10mL蒸餾水沖洗，加10mL甲醇溶出，溶出液用液相色譜儀分析。

氯霉素的提取。

    稱取10.0g樣品于100mL比色管中，加入磷酸鹽緩沖液30mL，搖勻，慢慢加入50%三氯乙酸溶液，用磷酸鹽緩沖溶液定容至50mL，樣品液全部轉(zhuǎn)移至勻漿瓶，用組織勻漿機(jī)高速勻漿1min，室溫下放置15min，過濾，收集濾液，經(jīng)0.45μm濾膜再過濾，取濾液進(jìn)行液相色譜分析。

    測(cè)定后，比較其峰面積，利用外標(biāo)法定量。